犬松弛素（RLN-6B6）質(zhì)控品目前對松弛素基因的研究主要集中在人、小鼠、豬等物種上,國外已克隆了犬前松弛素原(preprorelaxin)的基因序列,鑒于此,本研究以犬胎盤、卵巢組織為材料,應用RT-PCR技術(shù)獲得多條犬前松弛素原基因cDNA,進行克隆并作生物信息學分析,同時構(gòu)建犬松弛素原(prorelaxin)原核表達載體,轉(zhuǎn)化入大腸桿菌中,使其表達相應蛋白質(zhì)。再將表達的重組蛋白免疫新西蘭兔以制備多克隆抗體。上述方法大程度的推動了松弛素的結(jié)構(gòu)和功能的研究。本研究具體如下：1、犬前松弛素原基因的克隆和生物信息學分析本研究以北京犬和吉娃娃新生胎盤、貴賓犬卵巢為材料,采用RT-PCR技術(shù)擴增前松弛素原基因,結(jié)果顯示：本實驗完整克隆了從所獲樣品中擴增到的預期大小目的片段,包含一個534bp的開放閱讀框,編碼177個氨基酸。將所擴增片段進行序列分析顯示,與NCBI核酸數(shù)據(jù)庫檢索的犬preprorelaxin的cDNA序列同源性為99.6%,均有3個核苷酸位點發(fā)生改變,從而引起相應氨基酸改變,但并未引起蛋白結(jié)構(gòu)的變化。進化樹分析結(jié)果顯示,所獲三條目的片段同為一支,與貓preprorelaxin基因的進化距離近。生物信息分析顯示,3條序列等電點、帶電荷數(shù)、氨基酸、消光系數(shù)、半衰期、不穩(wěn)定系數(shù)一致,分子式分子量、不穩(wěn)定系數(shù)、脂肪系數(shù)、總平均疏水指數(shù)有細微差異；跨膜區(qū)、信號肽、糖基化位點分析結(jié)果一致：二級結(jié)構(gòu)組成一致,包含α-螺旋、延伸鏈、無規(guī)則卷曲,比例存在細微差異。

犬松弛素（RLN-6B6）質(zhì)控品

本產(chǎn)品僅供科研，不得用于臨床，醫(yī)療，食用等